朱遠峰 劉洪波 吳衍恒. 流感病毒RNA在RNA抽提試劑裂解緩沖液中的穩定性. 中國生物制品學雜志 2014年10期
發表人:kickingbird 發表時間:2014年11月22日11点57分 來源:中國生物制品學雜志 2014年10期
目的 評價RNA抽提試劑的裂解緩沖液(lysis buffer,LB)對流感病毒(influenza virus,Flu-V)RNA的穩定作用。方法 將流感病毒臨床分離株A/Zhongshan/085/2009(H1N1)進行10-2稀釋,加入RNA抽提試劑的LB後,分別置4和-20℃保存7、15、30和45 d,以未經LB處理的Flu-V稀釋物作為對照。提取各樣品核酸後,分別采用實時RT-PCR(靶序列長105 bp)和普通RT-PCR(擴增子長527 bp)進行檢測。結果 經LB處理的樣品,在4和-20℃保存45 d,均能檢測到特異性擴增信號;在4℃保存30 d,-20℃保存45 d,均可用於較長核酸片段的擴增分析。而未經LB處理的樣品,在-20℃也可穩定45 d,用於該兩種RT-PCR的檢測,但在4℃僅7 d時能檢測到527 bp的靶序列,30 d時,兩種RT-PCR方法均未檢測到靶序列。結論LB可延緩流感病毒RNA的降解,具有用作流感病毒核酸檢測樣品穩定劑的潛能。
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