目的構建重組H5亞型禽流感疫苗株。方法采用RT-PCR技術,分別擴增鵝源高產禽流感病毒A/Goose/Dalian/3/01(H9N2)的6條內部基因片段、高致病性禽流感病毒株A/Goose/HLJ/QFY/04(H5N1)的血凝素(HA)基因和N3亞型參考株A/Duck/Germany/1215/73(H2N3)的神經氨酸酶(NA)基因,並對HA1和HA2連接肽處的5個堿性氨基酸(R-R-R-K-K)的編碼序列進行缺失與修飾,然後分別構建這8個基因的轉錄與表達載體,將其共轉染293T/MDCK混合培養細胞單層,對拯救出的重組病毒進行表型分析。結果利用反向遺傳學技術拯救出了全部基因都源於禽流感病毒的疫苗株,其基因序列符合設計要求包括刪除HA基因的毒力相關序列,疫苗株的表型為H5N3。結論構建成功重組禽流感疫苗株rH5N3,為制備H5亞型禽流感疫苗打下了堅實的基礎。

采用反向遺傳學技術構建H5亞型禽流感疫苗株.pdf