目的根據A型AIV的M基因和HA基因序列，設計了兩對引物。其中XZ145—2和XZ146為通用引物。可檢測所有A型AIV，跨幅為244bp；XZH5—1和XZH5—5為H5亞型AIV特異性引物，跨幅為860bp。通過對多重RT-PCR擴增條件的優化，建立了快速檢測鑒別H5亞型AIV多重RT—PCR。該多重RT—PCR對H5亞型AIV同時擴增出兩條大小分別為244bp和860bp的cDNA片段，對其他A型AIV只擴增出244bp的cDNA片段，對其它常見禽病病原則無244bp和860 bp cDNA片段出現。該多重RT—PCR對H5亞型AIV RNA最低檢出量為10pg。該多重RT—PCR對AIV人工感染雞臨床樣品和雞胚分離物進行檢測，結果其檢出率為100％。

多重反轉錄聚合酶鏈反應檢測H5亞型禽流感病毒方法的建立.pdf