根據已發表的禽流感病毒M1基因序列設計合成PCR克隆引物,自接種H5N1亞型病毒的雞胚組織中提取RNA,反轉錄後采用高可信度DNA聚合酶(PyobestTMDNA Polymerase)經PCR擴增M1基因,采用Invitrogen定向表達系統(ChampionTMpET directional TOPO expression system)進行克隆表達,純化獲得N末端攜帶多聚組氨酸標簽的重組蛋白,分子量約29.8 kDa。采用單克隆抗體和陽性血清經ELISA、阻斷ELISA、免疫印跡分析重組蛋白的免疫反應性。結果發現:重組M1蛋白能與單克隆抗體和陽性血清發生特異性結合,且此結合能被天然病毒抗原阻斷。研究表明:重組蛋白M1具有良好免疫反應性。
禽流感病毒M1蛋白的表達及其免疫反應性分析.PDF