目的:對H5N1亞型禽流感病毒株(A Qa ST85201)的ns1基因進行修飾並構建ns1基因的真核表達載體。方法:用RT PCR方法擴增A Qa ST85201的ns1基因,之後以擴增産物爲模板,采用多重PCR技術對ns1基因進行修飾,將缺失的15個核苷酸片段插入ns1基因中,並將其克隆到真核表達載體,構建pcDNA3.1ns1重組質粒。結果:RT PCR産物測序顯示,A Qa ST85201ns1基因開放閱讀框全長678bp,編碼225個氨基酸。構建的重組質粒經酶切鑒定和序列測定與預期相一致。結論:成功將缺失的15個核苷酸片段引入A Qa ST85201的ns1基因中,重組質粒的構建爲NS1蛋白功能研究奠定了基礎。
H5N1亞型禽流感病毒ns1基因修飾.PDF