2020年高致病性H5N1禽流感病毒（2.3.4.4b譜系）的爆發標志著甲型流感病毒（IAV）宿主範圍的重大擴展，引發了人們對跨物種傳播事件和人畜共患溢出的擔憂。2.3.4.4b病毒在美國奶牛群中的引入導致廣泛流行，並伴隨產奶量下降、乳腺炎及乳汁病毒載量升高。值得注意的是，奶牛體內病毒循環已成為哺乳動物適應與傳播的新途徑，自2024年以來已在美國引發40多例人類病例。由於血凝素（HA）是決定病毒宿主範圍和組織嗜性的主要因素，我們研究了攜帶禽流感病毒2.3.4.4b亞譜系糖蛋白的病毒是否能感染安格斯牛、荷斯坦牛和利木贊牛的乳腺組織。我們使用乳腺組織切片，將表達三種2.3.4.4b病毒血凝素（HA）和神經氨酸酶（NA）的減毒重組病毒接種至組織中。這些病毒早於H5N1在美國牛群中的出現：A/chicken/England/053052/2021（AIV07）、A/chicken/Scotland/054477/2021（AIV09）和A/chicken/England/085598/2022（AIV48）。通過免疫組化檢測發現，在接種AIV09和AIV48後，所有三種牛品種的乳頭和腺體囊腔切片均檢測到病毒核蛋白（NP）抗原，表明這三種受試牛品種的乳腺組織均易感攜帶H5N1糖蛋白的病毒感染。凝集素染色結果顯示，所有供體的乳腺組織均表達α2,3-和α2,6連接的唾液酸，表明這三種牛品種均有潛力支持禽源和哺乳動物適應性流感病毒的感染。這些發現共同表明，肉牛和奶牛品種的乳腺均易受攜帶禽源H5N1糖蛋白的病毒感染，並提示牛乳腺組織可能為多種流感病毒（IAVs）共同感染同一組織提供環境。這一可能性凸顯了進一步研究的必要性，以及將肉牛和奶牛均納入H5N1監測與風險評估體系的必要性