在2024年末，加拿大和美國的兩名個人因感染H5N1 2.3.4.4b基因型D1.1禽流感病毒導致的急性呼吸窘迫而在重症監護室接受治療。從這些患者采樣獲得的病毒序列數據顯示，在血凝素（HA）位點190和226存在混合等位基因。這些位點的突變是HA使用α2,6-連接唾液酸（SA）的關鍵決定因素，而α2,6-連接唾液酸是人類上呼吸道中最豐富的流感受體。因此，這些突變引發了人類適應性和H5N1病毒大流行潛力的擔憂。在本研究中，我們調查了H5 HA在殘基190和226處突變的影響。我們使用重組蛋白、假型慢病毒以及在逆向遺傳背景下的流感病毒研究了這些突變的受體結合特性、細胞進入表型及適應性影響。這些突變無論是單獨存在還是組合存在，都沒有賦予可檢測的α2,6-連接唾液酸受體的使用能力。相反，攜帶這些突變的病毒對α2,3-連接唾液酸受體的結合能力減弱。這與增強逃避人體氣道黏液的能力以及對奧司他韋和紮那米韋的敏感性降低相關。這項研究強調，除了HA與SA作為進入受體的相互作用方式外，影響HA/NA平衡的其他因素也可能影響人類呼吸道中人畜共患病毒的進化軌跡。本研究提出了HA進化驅動因素的新範式，其中降低的唾液酸結合能力可以作為逃避宿主屏障和抗病毒藥物的一種優勢。