2024年，美國疾病控制與預防中心（CDC）和國家標准與技術研究院（NIST）啟動跨機構合作，旨在加強針對2021年起在北美持續流行的高致病性禽流感A(H5N1) 2.3.4.4b亞型病毒的疫情應對准備。包括奶牛群暴發和人類病例激增在內的多次跨物種傳播事件，推動了RNA參考材料的研發，以輔助新型診斷技術的開發與驗證。在CDC序列數據支持下，NIST制備了A(H5N1)血凝素、神經氨酸酶以及基質蛋白1和2基因片段的三種合成RNA材料。在此，我們描述了利用液滴數字反轉錄聚合酶鏈式反應技術開發和表征這些參考材料的過程。通過此次合作，我們得以迅速向公眾提供定量、均質、穩定且符合流行病學需求的RNA參考材料，以支持新型檢測方法的開發與驗證。