近年來，H5亞型高致病性禽流感病毒（HPAIVs），尤其是2.3.4.4b分支，對家禽、牛以及公共健康構成了全球威脅。從2000年到2023年的H5亞型禽流感病毒生物信息學分析顯示，PA-X N193S突變逐漸增加，並在2.3.4.4b分支的禽類和哺乳類分離株中成為優勢突變。通過逆向遺傳學，我們生成了帶有PA-X 193N（rWT）和193S（rWT-N193S）的病毒。PA-X N193S突變顯著抑制了病毒聚合酶活性，同時增強了宿主蛋白表達抑制作用。在體外和體內實驗中，rWT-N193S在禽類和哺乳類細胞中的複制減弱，小鼠致病性降低，並抑制了細胞因子風暴。然而，它增強了樹突狀細胞（DC）的攝取，但卻損害了DC的成熟、激活、細胞因子分泌和CD4 T細胞增殖。在小鼠鼻黏膜實驗中，PA-X N193S突變減少了CCL5的表達，改變了DC的招募，並抑制了IL-17/MAPK信號通路。這些發現揭示了病毒的權衡：該突變減弱了上皮細胞的複制和免疫病理反應，但增強了DC的攝取並破壞了黏膜免疫功能，這種策略可能促成了PA-X N193S突變在H5亞型流行病毒中的全球優勢。