高致病性禽流感A(H5N1)病毒屬2.3.4.4b亞群D1.1基因型，是家禽大規模爆發的主要原因，也持續引發零星、有時嚴重的人類感染。在這裏，我們對一株野生型(WT) H5N1 D1.1分離株（BC-H5N1-WT）及其H275Y神經氨酸酶(NA)變異株（BC-H5N1-H275Y）進行了研究，這兩種病毒都在2024年秋季加拿大不列顛哥倫比亞省的農場出現。體外分析中我們考察了其在MDCK細胞中的複制動力學，提取感染後不同天數(p.i.)的上清液，並通過TCID50和qRT-PCR進行滴度測定。通過NA抑制實驗確定了神經氨酸酶抑制劑(NAI)的敏感性，而對巴洛沙韋酸(BXA)的敏感性則通過斑點減少實驗評估。體外分析評估了MDCK細胞中的複制動力學，感染後不同天收集上清液，並通過TCID50和qRT-PCR測定滴度。神經氨酸酶抑制劑（NAI）的敏感性通過NA抑制實驗確定，而巴洛沙韋酸（BXA）的敏感性則通過斑塊減少實驗評估。體內毒力在感染了每種病毒十倍系列稀釋液的BALB/c小鼠中進行評估，以監測體重下降和死亡率。感染第4天，測定肺、腦、鼻、腎、脾和心髒中的病毒滴度。BC-H5N1-WT病毒對測試的四種抗病毒藥物都敏感，而BC-H5N1-H275Y對奧司他韋和帕拉米韋表現出耐藥，但仍對紮那米韋和BXA敏感。BC-H5N1-WT 在所有測試時間點的病毒複制滴度都明顯高於 BC-H5N1-H275Y，而且斑塊尺寸也更大。在小鼠體內，BC-H5N1-WT的毒力更強，LD50值為1.78×103PFU，而BC-H5N1-H275Y為8.71×10?PFU，並且在肺和其他器官中產生了更高的病毒滴度。盡管耐藥的H5N1 D1.1變體適應性降低，但其在沒有病毒選擇壓力情況下的出現仍強調了持續監測的必要性。