高致病性禽流感（H5N1）病毒，屬於2.3.4.4b類群，已在全球鳥類種群造成重大損失，並多次感染包括人類在內的哺乳動物，但未實現持續的人際傳播。這裏我們展示了於2024年在德克薩斯州從牛奶中分離出的H5N1病毒（H5N1Tex/24），在分化的人類鼻上皮細胞中複制效率與2009年流行的H1N1病毒株（H1N1 HH4/09）相當。），溫度分別為37°C和33°C。 適應性突變PB2 M631L和PA K497R在33°C促進複制，但在37°C時對複制無影響。 一種H5N1病毒（H5N1BE/22）於2022年從一只鹈鹕中分離出來，該鹈鹕沒有這些突變，在37°C下複制效率高，但在33°C下表現較差，這一限制並未被引入PB2 M631L和PA K497R突變所克服。分化的鼻上皮細胞培養表達了人類和禽流感病毒的受體。因此，沒有檢測到與受體特異性改變相關的HA突變。H5N1Tex/24 能夠有效抑制幹擾素-λ的產生，但仍然對這種細胞因子的抗病毒作用敏感。這些發現表明，H5N1Tex/24 具有在分化的人類上呼吸道細胞培養中高效複制的內在特性。