H5N1亞系2.3.4.4b對牛乳腺的非典型嗜性，可引發無明顯呼吸道症狀的壞死性乳腺炎，這引發了對其潛在機制的關鍵質疑。我們采用糖組學和連接特異性凝集素組織化學技術，分析唾液酸（SA）受體多樣性與解剖分布特征；同時通過病毒結合實驗和高分辨率電子顯微鏡（EM）觀察病毒-受體相互作用。牛乳腺組織富含N-和O連接的SA糖苷，對亞系2.3.4.4b H5的結合親和力顯著高於亞系2.2 H5；相比之下，牛氣管僅含O連接但不含N連接SA，且未檢測到H5結合，表明氣管上皮細胞缺乏可兼容的流感A病毒（IAV）受體。病毒結合組織的EM進一步證實了H5N1感染牛的受體基礎。隨著H5N1病毒繼續感染非典型宿主（如首例羊感染病例所示），我們的研究提供了一套評估流感病毒易感性的方法框架。