自2024年初首次感染奶牛以來，高致病性禽流感病毒H5N1已在美國奶牛群中持續傳播。盡管國家策略旨在本次疫情中監測受影響牛群，但關於縱向牛群層面病毒檢測的信息尚未進行正式研究。為了解H5N1在受感染奶牛群中隨時間推移的乳汁病毒排泄情況，我們於2024年秋季和冬季對加州奶牛場開展了疫情調查。本次觀察性調查的主要目標是確認這些加州牛群的H5N1初始感染，並通過縱向批量乳池奶（BTM）檢測評估病毒分布。次要目標是評估通過縱向乳頭水平乳汁（PLM）采樣評估病毒傳播情況，研究對象為部分受影響畜群。來自19個最初未感染、但作為單一獸醫診所客戶並自願參與本研究的畜群，每日提交鼻拭子樣本（BTM）。采用逆轉錄聚合酶鏈式反應（rRT-PCR）檢測流感病毒A型（IAV）。在其中5個畜群中，於初次BTM IAV檢測後不久即完成每日PLM IAV檢測。總計提交4,749份BTM樣本和2,922份PLM樣本進行檢測，最終所有畜群均感染IAV。在初步檢測後，BTM每天都會檢測到IAV，持續時間至少為33天，一些畜群在采樣期結束時（>75天）仍會繼續檢測到。首次檢測後1-3周出現BTM-Ct最低值。在PLM測試的牛群中，BTM檢測後不久，在所有牛欄的樣本中都檢測到了病毒，在某些情況下，PLM采樣的第一天，在所有牛欄中都發現了病毒。總體而言，這些結果支持BTM檢測作為乳制品H5N1疫情的有效早期檢測工具，但表明，不在手術中檢測所有泌乳奶牛的聚集乳，或BTM檢測日之間間隔較長的監測策略可能無法識別所有受影響的牛群。未來的研究應研究與某些畜群長期病毒檢測相關的農場因素，並評估用於聚集牛奶樣本的IAV rRT-PCR檢測的靈敏度。