一種稱為K亞譜系的H3N2變種在2025-2026流感季節仍廣泛傳播。該病毒的血凝素（HA）蛋白相較於北半球2025-2026 H3N2疫苗株的HA有十一處替換。這些替換中許多位於已充分研究的HA抗原位點上的表位。盡管如此，中期疫苗有效性研究顯示，2025-2026年流感疫苗對H3N2 K亞譜系感染提供中等保護。我們之前報告稱，許多接種2025-2026年流感疫苗的人產生了抑制H3N2 K亞譜系病毒細胞附著的抗體。在此，我們展示了這些個體還產生了中和H3N2 K亞譜系病毒感染的抗體，並觀察到血凝抑制（HI）滴度與中和抗體滴度之間存在較強相關性。我們使用來自有或沒有交叉反應H3N2亞群K病毒抗體的個體的樣本完成了額外的特異性研究。通過高通量中和測定，我們確定了結合疫苗株但不結合H3N2亞群K病毒的抗體通常針對HA的抗原位點B。相反，我們發現疫苗誘導的交叉反應中和抗體通常以HA的抗原位點A、D和E為靶，這些位點在疫苗株與H3N2 K亞分支病毒之間是保守的。基於電子顯微鏡的多克隆表位圖譜研究進一步證實，疫苗誘導的交叉反應抗體通常靶向HA側面的表位。綜合來看，我們的研究為2025-2026年度流感疫苗對抗原性進化的H3N2 K亞分支病毒部分有效提供了免疫學解釋。我們的數據表明，未來季節的疫苗株需要謹慎選擇，因為K亞分支病毒已經開始在交叉反應抗體靶向的HA抗原位點上獲得額外的突變。