主要存在於牲畜中的D型流感病毒（IDV）已被證明具有跨物種傳播的潛力，但其對人類的威脅仍然知之甚少。在這裏，我們策劃了一組在2011年至2020年的現場監測期間從豬和牛身上收集的IDV分離物，以評估它們感染人類氣道細胞的能力，作為人畜共患病威脅評估的指標。使用肺上皮細胞系、原代分化良好的氣道上皮培養物和精確切割的肺切片，我們證明IDV在人類呼吸道的細胞和組織中有效傳播，達到與人類甲型流感病毒（IAV）相當的滴度。豬原代氣道培養物和呼吸組織中的感染動力學與人類相似，表明不同物種的感染性相似。為了確定宿主對IDV感染的反應，我們評估了人類呼吸細胞中的先天免疫感應和下遊幹擾素信號傳導。與IAV相比，IDV感染導致幹擾素調節因子（IRF）信號傳導的激活顯著降低，幹擾素λ1和幹擾素刺激基因的誘導減少，表明先天免疫感應通路的激活效率低下。然而，IDV在幹擾素預處理的細胞中的複制受到強烈限制，表明一旦建立抗病毒狀態，對幹擾素介導的抗病毒效應機制具有敏感性。總之，這些發現表明，IDV可以有效地感染人類氣道，同時限制先天免疫感應，這一特征可能有助於人畜共患疾病的傳播。我們的研究強調了加強動物-人類界面IDV監測的必要性，並為進一步研究其生物學特性和引起人類感染和疾病的潛力奠定了基礎。