自2024年3月以來，高致病性的H5N1亞型禽流感病毒感染了美國奶牛並在奶牛場中傳播。奶牛場需要H5N1監測系統，但關於環境采樣是否能為這些系統提供信息尚不足。為指導監測框架，我們確定了四個州（加利福尼亞、科羅拉多、密歇根和俄亥俄）H5N1影響乳品場（n=25）上存在甲型流感病毒（IAV）的環境位置，並探討了可能影響病毒檢測的樣本特征。共計623個來自環境和銷售穀倉的樣本進行了IAV鑒定，並根據位置分為六個類別。共檢測到94個樣本（15.1%）檢測到IAV，大多數類別包括：擠奶設備/個人防護裝備、客廳表面和汙水/瀉湖/糞便。這些結果表明，最可能孕育IAV的乳制品環境是接觸牛奶的環境，盡管環境樣本中的病毒載量通常低於在部分農場測試的散裝罐牛奶。采用混合效應建模，探討IAV檢測、Ct值與疫情發生天數及樣本采集類別之間的關系。疫情發生後采集的樣本與IAV檢測相關，采集類別與測得的Ct值相關。這些結果可能指導乳制品場的H5N1監測工作，並通過在H5N1疫情前、中、後采集農場環境樣本的研究得到加強。