在美國哺乳奶牛中檢測到H5N1高致病性禽流感病毒（HPAIV），在生牛奶中病毒滴度較高，引發了人們對通過未巴氏殺菌牛奶和乳制品傳播人畜共患病的擔憂。雖然有巴氏殺菌過程中病毒失活的記錄，但關於生乳奶酪持久性的數據仍然有限。本研究評估了禽流感病毒（AIVs），包括低致病性（LPAIV，H1N1）和高致病性（HPAIV，H5N1）在從生牛奶生產和成熟的Grana型硬質奶酪過程中的存活情況。實驗性奶酪制作使用了人工汙染A/duck/Italy/281904-2/06（H1N1;107.75 EID50/mL）或A/duck/Italy/326224-2/22（H5N1類群2.3.4.4b;106.75 EID50/mL）汙染的牛奶。奶酪按照帕爾馬幹酪-雷焦諾標准制造，在5–6°C下成熟30天。 成品奶酪中的病毒檢測通過特異性無病原體胚胎雞蛋（SPF-ECEs）、血凝（HA）測定和單克隆抗體ELISA進行。在兩次SPF-ECEs盲傳後，奶酪樣品中未檢測到傳染性病毒。HA和ELISA檢測均為陰性，表明病毒完全失活。這些結果表明，格拉納型奶酪加工，包括烹饪、酸化和成熟，能夠有效使LPAIV和HPAIV失活。研究結果支持生乳硬質奶酪關於AIV的微生物學安全性，有助於風險評估和食品安全政策。