H9N2目前是感染人類的第二大最常見的甲型禽流感病毒亞型。監測病毒對人類的表型和基因型適應對於風險評估至關重要。在這裏，我們比較了2024年收集的H9N2人類分離株（A/HK/2346/2024）與1999年收集的曆史人類分離株（A/HK/1073/1999）的複制。在Madin-Darby犬腎（MDCK）細胞中，A/HK/2346/2024和A/HK/1073/1999分別複制至每毫升8個log10和5個log10噬菌斑形成單位（PFU）。在人類鼻和肺類器官中，A/HK/2346/2024複制至6 log10 PFU/ml，但A/HK/1073/1999未能在任一類器官中複制。A/HK/2346/2024的纖毛細胞和非纖毛細胞的感染率均高於A/HK/1073/1999，A/HK/2346/2024的感染2,6/2,3細胞的比例也較高。除了在症狀發作後第1天（pso）收集的鼻咽標本中存在的哺乳動物適應性替代（HA-D183N/D190 T/Q192R/Q226L；NA-del62-64；PB2-A588 V/K702R；PB1-I368 V；PA-K356R/S409N；M1-R95 K），哺乳動物適應性替代PB2-D253N在第7天pso從頭出現。分析所有人類（n?=?96) 和禽流感（n?=?14762) 存放在GISAID的H9N2顯示了近年來從人類收集的H9N2菌株中幾種人類適應替代的優勢。總之，我們證明了最近的H9N2病毒更適合人類，並且能夠在上呼吸道和下呼吸道中複制到高滴度，這可能賦予更高的人與人之間的傳播性和毒力。我們的研究強調了基於人類類器官的表型監測和宿主間/宿主內基因型監測對於評估禽流感病毒人畜共患風險的重要性。