高致病性H5N1亞型禽流感病毒（譜系2.3.4.4b）可引起奶牛發生類似乳腺炎的疾病。牛奶中存在大量具有傳染性的H5N1病毒，引發了人們對生乳制品安全性的嚴重擔憂。本研究探討了溫度和pH值對H5N1病毒穩定性的影響。我們發現，無論是牛源性還是禽源性的H5N1病毒，在4攝氏度的牛奶中培養四周後仍保持傳染性。當病毒在21攝氏度的牛奶中培養時，禽源性H5N1病毒的傳染性僅略有下降，而牛源性H5N1病毒的傳染性則有所降低。禽源性H5N1病毒在50攝氏度下培養30分鍾仍保持穩定，但在更高溫度（55攝氏度10分鍾、60攝氏度1分鍾或72攝氏度30秒）下被滅活。牛源性和禽源性H5N1病毒在pH值6.0至10.0之間保持穩定，但在pH值5.0時部分滅活，在pH值4.0時完全滅活。在pH值4.2的酸奶中培養時，兩種H5N1病毒均被完全滅活。在pH 5.0至5.3的軟奶酪和半硬奶酪中孵育禽流感H5N1病毒，分別降低了5.1和3.9個log10的感染滴度。相比之下，牛的H5N1病毒在半硬奶酪中孵育後，感染性僅輕微降低。綜上所述，H5N1病毒能被巴氏殺菌和大多數熱處理有效滅活。然而，在未經處理的生牛奶中，如果制作奶酪的溫度低於50°C，牛的H5N1病毒可能存活。