2024年3月25日，美國農業部國家獸醫服務實驗室在得克薩斯州的一頭奶牛中確認了高致病性禽流感（HPAI）H5N1譜系2.3.4.4b基因型B3.13。這一確認是針對多州牛奶產量損失調查的回應。接種了該病毒的乳腺區的病毒排放量和持續時間表明，牛奶是病毒在奶牛群之間傳播的關鍵來源。巴氏殺菌已被證明可以滅活牛奶中的病毒，然而，食用受感染奶牛生牛奶的家貓已出現致命的系統性流感感染，這引發了對飲用未經巴氏殺菌牛奶的犢牛的擔憂。對受影響奶牛群的調查表明，在出現臨床症狀和診斷確認感染之前，牛奶樣本中存在病毒RNA長達兩周。 在此期間，未巴氏殺菌的牛奶可能對小牛構成風險。在此，我們試圖確定H5N1基因型B3.13毒株是否能通過喂食感染病毒的泌乳牛的未巴氏殺菌牛奶傳播給小牛。九頭約7至11周齡的荷斯坦小牛每天通過桶喂食兩次，每次0.95升未巴氏殺菌牛奶。兩頭未接種牛的牛奶喂養一頭陰性對照小牛，持續四天。從兩頭經乳腺內接種的感染荷斯坦泌乳牛中采集感染牛奶，在感染早期且血清轉化前，喂養四頭小牛，連續四天。此外，從另外兩頭經乳腺內接種的感染荷斯坦泌乳牛中，在血清轉化後感染中期采集牛奶，與感染早期的牛奶混合，喂養四頭小牛，連續四天。在最初的四天後，所有九頭小牛均喂食未接種牛的牛奶。未感染抗體的牛犢在喂食感染牛奶後，表現出包括流鼻涕、輕微發熱、輕度倦怠、腹瀉和輕微呼吸困難在內的臨床症狀，持續5至6天。鼻拭子樣本中持續檢測到病毒RNA，從感染後2天到4天的4頭牛犢中均檢測到，即使轉為喂食未感染牛的牛奶，檢測結果仍持續存在。感染通過鼻拭子、肺部病變、淋巴結和咽扁桃體中的抗原和病毒RNA檢測，以及血清轉換得以確認。鼻拭子的陽性PCR結果與牛犢的倦怠顯著相關（相關系數-0.55）。喂食帶有中和抗體牛奶的牛犢部分受到保護，未出現臨床症狀，僅1/4的牛犢鼻拭子中檢測到病毒RNA，且未觀察到血清轉換。這些數據顯示，H5N1陽性奶牛群或可疑奶牛的牛奶不應未經巴氏殺菌就喂給小牛。在奶牛養殖社區中，繼續對HPAI進行特征分析，確定傳播途徑是後續研究幹預和疫苗策略的基礎。