背景：2024年4月初，我們研究了前一個月遭受H5N1高致病性禽流感病毒（HPAIV）入侵的美國德克薩斯州兩個奶牛場。方法：我們采用分子檢測、細胞和雞胚培養、Sanger和下一代測序從多個農場標本（牛鼻拭子、牛奶標本、糞便和一只死鳥）中分離和鑒定病毒。結果：我們在64%（9/14）的牛奶樣本、2.6%（1/39）的牛鼻拭子樣本中檢測到H5N1高致病性禽流感病毒，在17名牛工鼻咽拭子樣本中未檢測到H5N1高致病性禽流感病毒。我們從8個H5N1陽性樣本中培養並鑒定了病毒。Sanger和下一代測序顯示，這些病毒與最近美國德克薩斯州流行的其他2.3.4.4b支系H5N1毒株密切相關。我們的分離物具有與增加的溢出潛力相關的多種突變。令人驚訝的是，我們在一頭病牛的鼻拭子中檢測到新冠病毒。此外，捐獻血清的農場工人中有14.3%（2/14）最近出現症狀，並且對相關H5N1毒株的中和抗體升高。結論：雖然我們的采樣有限，但這些數據為迄今為止影響美國12個州至少96個養牛場的大規模H5N1高致病性禽流感疫情提供了額外的見解。由於擔心研究可能會損害乳制品企業，像這樣的研究很少。我們需要找到與奶牛場合作的方法，收集更全面的流行病學數據，這些數據對於設計未來在美國養牛場針對H5N1高致病性禽流感的幹預措施是必要的。