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2020-3-29 10:30:32


卢建红 邵卫星 龙进学 刘玉良 石火英 刘秀梵. H9N2禽流感病毒反向遗传系统转录/表达载体的构建和验证. 中国病毒学-2005年4期
发表人:kickingbird  发表时间:2006年5月26日16点20分  来源:中国病毒学-2005年4期

设计带有BsmBI、BsaI或AarI酶切位点的引物,用RTPCR扩增H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的8个基因全长片段。克隆人双向转录/表达载体pHW2000,并在PB2、PB1和NA基因中共引入了3个沉默突变标签。将其2个表面基因(HA和NA基因)加上任意1个内部基因,而其它5个内部基因来自A/WSN/33,进行了6种3+5组合形式的基因重排,把相应组合的转录/表达质粒共转染COS-1细胞,均产生了预期组合、有感染性的H9N2亚型流感病毒,表明亲缘关系遥远的流感病毒可以互相获取基因片段产生重组病毒,提示表面结构基因和单个内部基因不足以限制H9N2 AIV在哺乳动物细胞上的宿主范围,同时也验证了构建的8个转录/表达载体均能有效工作,为进一步研究H9N2亚型AIV基因结构与功能、AIV与宿主之间的关系打下了基础。


H9N2禽流感病毒反向遗传系统转录/表达载体的构建和验证.pdf

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