目的根据A型AIV的M基因和HA基因序列，设计了两对引物。其中XZ145—2和XZ146为通用引物。可检测所有A型AIV，跨幅为244bp；XZH5—1和XZH5—5为H5亚型AIV特异性引物，跨幅为860bp。通过对多重RT-PCR扩增条件的优化，建立了快速检测鉴别H5亚型AIV多重RT—PCR。该多重RT—PCR对H5亚型AIV同时扩增出两条大小分别为244bp和860bp的cDNA片段，对其他A型AIV只扩增出244bp的cDNA片段，对其它常见禽病病原则无244bp和860 bp cDNA片段出现。该多重RT—PCR对H5亚型AIV RNA最低检出量为10pg。该多重RT—PCR对AIV人工感染鸡临床样品和鸡胚分离物进行检测，结果其检出率为100％。

多重反转录聚合酶链反应检测H5亚型禽流感病毒方法的建立.pdf