自2020年以来，2.3.4.4b亚系H5高致病性禽流感病毒引发了前所未有的全球大流行。我们此前报道过，自2020年出现以来，2.3.4.4b亚系H5N1病毒迅速形成了16种不同的基因型，其中四种在2022年3月前已在中国的野生鸟类和家禽中被检测到。为了监测这些病毒的传播与进化，我们于2022年4月至2024年7月期间从中国的野生鸟类栖息地、家禽养殖场和家禽屠宰场采集了60,286份样本，并分离出30株2.3.4.4b亚系H5流感病毒（25株H5N1和5株H5N6），其中19株来自野生鸟类样本，11株来自家养鸭和鹅。详细分析显示，这25株H5N1病毒和5株H5N6病毒分别形成了7种和3种基因型，其中只有2种H5N1病毒基因型曾被检测到，其余基因型均在本研究中首次发现。这些H5病毒在小鼠中表现出不同的致病性，从非致死到高度致死不等，但在抗原性上，它们与目前在中国使用的H5-Re14疫苗株均匹配良好。我们的研究结果表明，2.3.4.4b亚系的H5病毒仍在野生鸟类群体中地方性流行，并且会反复溢出至家禽水禽。因此，对2.3.4.4b亚系H5病毒的进化动态进行持续监测，对于制定循证的预防和控制策略至关重要。