在2024年末，加拿大和美国的两名个人因感染H5N1 2.3.4.4b基因型D1.1禽流感病毒导致的急性呼吸窘迫而在重症监护室接受治疗。从这些患者采样获得的病毒序列数据显示，在血凝素（HA）位点190和226存在混合等位基因。这些位点的突变是HA使用α2,6-连接唾液酸（SA）的关键决定因素，而α2,6-连接唾液酸是人类上呼吸道中最丰富的流感受体。因此，这些突变引发了人类适应性和H5N1病毒大流行潜力的担忧。在本研究中，我们调查了H5 HA在残基190和226处突变的影响。我们使用重组蛋白、假型慢病毒以及在逆向遗传背景下的流感病毒研究了这些突变的受体结合特性、细胞进入表型及适应性影响。这些突变无论是单独存在还是组合存在，都没有赋予可检测的α2,6-连接唾液酸受体的使用能力。相反，携带这些突变的病毒对α2,3-连接唾液酸受体的结合能力减弱。这与增强逃避人体气道黏液的能力以及对奥司他韦和扎那米韦的敏感性降低相关。这项研究强调，除了HA与SA作为进入受体的相互作用方式外，影响HA/NA平衡的其他因素也可能影响人类呼吸道中人畜共患病毒的进化轨迹。本研究提出了HA进化驱动因素的新范式，其中降低的唾液酸结合能力可以作为逃避宿主屏障和抗病毒药物的一种优势。