2024年，美国疾病控制与预防中心（CDC）和国家标准与技术研究院（NIST）启动跨机构合作，旨在加强针对2021年起在北美持续流行的高致病性禽流感A(H5N1) 2.3.4.4b亚型病毒的疫情应对准备。包括奶牛群暴发和人类病例激增在内的多次跨物种传播事件，推动了RNA参考材料的研发，以辅助新型诊断技术的开发与验证。在CDC序列数据支持下，NIST制备了A(H5N1)血凝素、神经氨酸酶以及基质蛋白1和2基因片段的三种合成RNA材料。在此，我们描述了利用液滴数字反转录聚合酶链式反应技术开发和表征这些参考材料的过程。通过此次合作，我们得以迅速向公众提供定量、均质、稳定且符合流行病学需求的RNA参考材料，以支持新型检测方法的开发与验证。