近年来，H5亚型高致病性禽流感病毒（HPAIVs），尤其是2.3.4.4b分支，对家禽、牛以及公共健康构成了全球威胁。从2000年到2023年的H5亚型禽流感病毒生物信息学分析显示，PA-X N193S突变逐渐增加，并在2.3.4.4b分支的禽类和哺乳类分离株中成为优势突变。通过逆向遗传学，我们生成了带有PA-X 193N（rWT）和193S（rWT-N193S）的病毒。PA-X N193S突变显着抑制了病毒聚合酶活性，同时增强了宿主蛋白表达抑制作用。在体外和体内实验中，rWT-N193S在禽类和哺乳类细胞中的复制减弱，小鼠致病性降低，并抑制了细胞因子风暴。然而，它增强了树突状细胞（DC）的摄取，但却损害了DC的成熟、激活、细胞因子分泌和CD4 T细胞增殖。在小鼠鼻黏膜实验中，PA-X N193S突变减少了CCL5的表达，改变了DC的招募，并抑制了IL-17/MAPK信号通路。这些发现揭示了病毒的权衡：该突变减弱了上皮细胞的复制和免疫病理反应，但增强了DC的摄取并破坏了黏膜免疫功能，这种策略可能促成了PA-X N193S突变在H5亚型流行病毒中的全球优势。