主要存在于牲畜中的D型流感病毒（IDV）已被证明具有跨物种传播的潜力，但其对人类的威胁仍然知之甚少。在这里，我们策划了一组在2011年至2020年的现场监测期间从猪和牛身上收集的IDV分离物，以评估它们感染人类气道细胞的能力，作为人畜共患病威胁评估的指标。使用肺上皮细胞系、原代分化良好的气道上皮培养物和精确切割的肺切片，我们证明IDV在人类呼吸道的细胞和组织中有效传播，达到与人类甲型流感病毒（IAV）相当的滴度。猪原代气道培养物和呼吸组织中的感染动力学与人类相似，表明不同物种的感染性相似。为了确定宿主对IDV感染的反应，我们评估了人类呼吸细胞中的先天免疫感应和下游干扰素信号传导。与IAV相比，IDV感染导致干扰素调节因子（IRF）信号传导的激活显着降低，干扰素λ1和干扰素刺激基因的诱导减少，表明先天免疫感应通路的激活效率低下。然而，IDV在干扰素预处理的细胞中的复制受到强烈限制，表明一旦建立抗病毒状态，对干扰素介导的抗病毒效应机制具有敏感性。总之，这些发现表明，IDV可以有效地感染人类气道，同时限制先天免疫感应，这一特征可能有助于人畜共患疾病的传播。我们的研究强调了加强动物-人类界面IDV监测的必要性，并为进一步研究其生物学特性和引起人类感染和疾病的潜力奠定了基础。