H3N8流感病毒经常从养鸡场分离出来。然而,对其病毒学特性,分子进化,毒力和溢出到哺乳动物中的风险的综合表征仍然有限。特别是,很少关注H3N8禽流感病毒在鸡中的传播效率及其溢出风险。在这里,我们通过多学科方法系统地表征了从无症状鸡获得的H3N8分离株,包括基因组监测,受体结合分析以及体内致病性和传播测定。所有菌株均显示?>?98% 与人类感染菌株的核苷酸同源性。系统发育分析表明,它们的内部基因来源于H9N2,而HA和PB2基因具有高度同源性(bootstrap支持)?>?98%) 新型H3N3病毒。所有分离株均维持禽型受体结合基序(HA-Q226/G228),同时在哺乳动物细胞中表现出双重α2,3/α2,6-唾液酸结合和强大的复制(MDCK峰值滴度:107.5 TCID)??/mL).ZJ07表现出优异的热稳定性(HA活性持续存在?>?3 JS13的神经氨酸酶活性比对照组高1.8倍(p?0.05). 在体内,所有菌株均在鸡和小鼠中引起亚临床感染,具有广泛的组织嗜性,无需适应,可在直接接触的家禽中有效传播。引人注目的是,AH12在鸡中实现了100%的空气传播。这些发现证实了H3N8沉默家禽循环的能力,并确定了有利于跨物种感染的关键特征,包括双受体结合,哺乳动物模型的感染以及与人类菌株的高度遗传同源性。AH12的空气传播性强调了溢出风险的增加,因此需要加强针对禽-人界面毒株的监测和疫苗。