高致病性禽流感（HPAI）H5N1病毒对全球健康构成越来越大的威胁，特别是在其前所未有的蔓延到奶牛并随后传播到18个州的1000多个奶牛场之后。这项研究调查了在不同哺乳动物细胞系（MDCK，MDBK，A549，Vero，MV1）中存在和不存在生乳的情况下，宿主细胞对不同H5N1毒株（牛和水貂衍生的H5N1）的反应。我们的研究结果表明，牛源性H5N1毒株比水貂源性H5N1毒株表现出更强大的复制能力，并证明了宿主内病毒的进化，并通过深度测序检测到新出现的氨基酸替代。尽管生乳补充剂不能直接增强体外病毒复制，但它显着调节宿主基因表达，通常会抑制关键的抗病毒干扰素刺激基因（ISG）反应，并破坏基本的宿主细胞过程，如细胞内运输和唾液酸生物合成。这些宿主基因调节是细胞类型和菌株特异性的，表明理论上可能影响病毒-宿主动力学的复杂相互作用，尽管这些体外观察的生物学意义需要通过感染性病毒测定和体内研究进行验证。这项产生假设的工作提供了对H5N1牛奶相互作用的初步见解，强调需要进一步的机制研究，以评估乳制品环境中病毒传播的潜在影响。