禽流感病毒继续对家禽和人类健康构成挑战;因此,对新出现病毒的仔细监测和评估对于动物疾病控制和人类流感大流行准备至关重要。在这项研究中,我们在2022年9月至2023年5月的常规监测和诊断中,在鸡、鸽子和鸭子中检测到一系列H3N3亚型禽流感病毒。我们进行了广泛的分析,以全面了解这些病毒的起源及其对动物和人类的风险。我们发现这些病毒是复杂的重配体;鸡和鸽子的病毒携带的基因主要来自H3N8病毒和H10N3病毒,而两种鸭病毒是鸭和野鸟病毒的重配体。鸡和鸽子,但不是鸭子的病毒在鸡的多个器官中复制,并且可以排毒长达13天,但没有引起疾病或死亡。我们测试的6种病毒均能结合禽类和人类受体。17种病毒在小鼠中测试,其中大多数能高效复制但未致死。6种病毒在豚鼠中测试,其中4种能通过飞沫有效传播。本研究鉴定出新型H3N3禽流感病毒,揭示了其人畜共患病潜力,强调了对动物中H3病毒进行严密监测和控制的重要性。