背景：2024年4月初，我们研究了前一个月遭受H5N1高致病性禽流感病毒（HPAIV）入侵的美国德克萨斯州两个奶牛场。方法：我们采用分子检测、细胞和鸡胚培养、Sanger和下一代测序从多个农场标本（牛鼻拭子、牛奶标本、粪便和一只死鸟）中分离和鉴定病毒。结果：我们在64%（9/14）的牛奶样本、2.6%（1/39）的牛鼻拭子样本中检测到H5N1高致病性禽流感病毒，在17名牛工鼻咽拭子样本中未检测到H5N1高致病性禽流感病毒。我们从8个H5N1阳性样本中培养并鉴定了病毒。Sanger和下一代测序显示，这些病毒与最近美国德克萨斯州流行的其他2.3.4.4b支系H5N1毒株密切相关。我们的分离物具有与增加的溢出潜力相关的多种突变。令人惊讶的是，我们在一头病牛的鼻拭子中检测到新冠病毒。此外，捐献血清的农场工人中有14.3%（2/14）最近出现症状，并且对相关H5N1毒株的中和抗体升高。结论：虽然我们的采样有限，但这些数据为迄今为止影响美国12个州至少96个养牛场的大规模H5N1高致病性禽流感疫情提供了额外的见解。由于担心研究可能会损害乳制品企业，像这样的研究很少。我们需要找到与奶牛场合作的方法，收集更全面的流行病学数据，这些数据对于设计未来在美国养牛场针对H5N1高致病性禽流感的干预措施是必要的。